任意の細胞から DNA を抽出する方法
あらゆる生物から簡単に DNA を抽出
ブラックジャック3D /ゲッティイメージズ
DNA またはデオキシリボ核酸は、 遺伝情報をコード化する ほとんどの生物で。いくつか 細菌は RNA を利用する しかし、他の生物は、このプロジェクトの DNA ソースとして機能します。 DNA の抽出と分離は簡単で、その後の実験に使用できます。
DNA抽出材料
どのような DNA ソースも使用できますが、特にうまく機能するものもあります。乾燥スプリットグリーンピースなどのエンドウ豆は優れた選択肢です.ほうれん草の葉、イチゴ、鶏レバー、バナナなどもおすすめです。単純な倫理上の問題として、生きている人やペットの DNA を使用しないでください。サンプルに実際に多くの DNA が含まれていることを確認してください。古い骨、歯、または貝殻は、主にミネラルで構成され、遺伝物質の痕跡しかありません。
- 100 ml (1/2 カップ) の DNA ソース
- 1ml(小さじ1/8)の食卓塩、NaCl
- 冷水 200ml(1カップ)
- する酵素 変性 タンパク質(肉軟化剤、新鮮なパイナップル ジュース、コンタクト レンズ洗浄液など)
- 液体食器用洗剤 30ml(大さじ2)
- 70~90% 消毒用アルコール または他のイソプロピルまたはエチルアルコール
- ブレンダー
- ストレーナー
- カップやボウル
- 試験管
- ストローまたは木の串
DNA 抽出を実行します。
- DNA ソース 100 ml、塩 1 ml、冷水 200 ml を混ぜ合わせます。これには、高設定で約 15 秒かかります。あなたが目指しているのは 同種の スープの混合物。ブレンダーは細胞を分解し、内部に保存されている DNA を放出します。
- ストレーナーを通して液体を別の容器に注ぎます。あなたの目標は、大きな固体粒子を取り除くことです。液体を保管してください。固形物を捨てる。
- 30mlの液体洗剤を液体に加えます。液体を攪拌または旋回させて混合します。次のステップに進む前に、この溶液を 5 ~ 10 分間反応させます。
- 各バイアルまたはチューブに、少量の肉軟化剤またはパイナップル ジュースまたはコンタクト レンズ クリーナー ソリューションの噴出を追加します。内容物を穏やかに旋回させて酵素を組み込みます。激しくかき混ぜると DNA が壊れ、容器の中で見にくくなります。
- 各チューブを傾け、各ガラスまたはプラスチックの側面からアルコールを注ぎ、液体の上に浮遊層を形成します。アルコールは水よりも密度が低いため、液体に浮きますが、混合するのでチューブに注ぎたくありません。アルコールと各サンプルの間の界面を調べると、白い糸状の塊が見えるはずです。これがDNAだ!
- 木製の串またはストローを使用して、各チューブから DNA をキャプチャして収集します。顕微鏡または虫眼鏡を使用して DNA を調べるか、保存するためにアルコールの入った小さな容器に DNA を入れることができます。
使い方
最初のステップは、多くの DNA を含むソースを選択することです。使えますが どこからでも DNA 、DNA の高いソースは、最終的により多くの製品を生成します。ヒトゲノムは、 二倍体 、各 DNA 分子の 2 つのコピーが含まれていることを意味します。多くの植物には、その遺伝物質の複数のコピーが含まれています。たとえば、イチゴは八倍体で、各染色体が 8 コピー含まれています。
検体を混合すると細胞が分解されるため、DNA を他の分子から分離できます。塩と界面活性剤は、通常 DNA に結合しているタンパク質を剥ぎ取る働きをします。界面活性剤はまた、サンプルから脂質 (脂肪) を分離します。酵素はDNAを切断するために使用されます。なんで切りたいの? DNA は折りたたまれてタンパク質に巻き付いているため、分離する前に解放する必要があります。
これらのステップを完了した後、DNA は他の細胞成分から分離されますが、それでも溶液から取り出す必要があります。ここでアルコールの出番です。サンプル中の他の分子はアルコールに溶解しますが、DNA は溶解しません。溶液にアルコールを注ぐと(冷たいほど良い)、DNA分子が沈殿して回収できるようになります。
ソース
- Elkins、K.M. (2013)。 「DNA抽出」。 法医学DNA生物学 . pp.39–52。 doi:10.1016/B978-0-12-394585-3.00004-3. ISBN 9780123945853。
- ミラー、D.N.;ブライアント、JE。マドセン、E.L.; Ghiorse、W.C. (1999 年 11 月)。 「土壌および堆積物サンプルの DNA 抽出および精製手順の評価と最適化」。 応用および環境微生物学 . 65 (11): 4715–24.