顕微鏡スライドの準備方法

科学者の手袋をはめた手が顕微鏡下で細胞培養プレートを確認します

トム・グリル/ゲッティイメージズ





ウェット マウントは、生きているサンプル、透明な液体、および水生サンプルに使用されます。ウェットマウントはサンドイッチのようなものです。一番下のレイヤーはスライドです。次は液体サンプルです。蒸発を最小限に抑え、サンプルへの露出から顕微鏡レンズを保護するために、透明なガラスまたはプラスチック (カバースリップ) の小さな正方形が液体の上に置かれます。



フラット スライドまたはデプレッション スライドを使用してウェット マウントを準備するには、次の手順に従います。

  1. スライドの中央に 1 滴の液体 (水、グリセリン、イマージョン オイル、または液体サンプルなど) を置きます。
  2. まだ液体の中にないサンプルを表示する場合は、ピンセットを使用してサンプルをドロップ内に配置します。
  3. カバースリップの片側を斜めに置き、その端がスライドとドロップの外縁に触れるようにします。
  4. 気泡を避けながら、ゆっくりとカバースリップを下げます。気泡に関する問題のほとんどは、カバースリップを斜めに適用していない、液滴に触れていない、または 粘性 (濃い)液体。液滴が大きすぎると、カバースリップがスライド上に浮き、顕微鏡を使用して被写体に焦点を合わせるのが難しくなります。

一部の生物は、動きが速すぎてウェット マウントでは観察できません。解決策の 1 つは、「プロト スロー」と呼ばれる市販の製剤を 1 滴追加することです。カバースリップを適用する前に、溶液の滴を液滴に追加します。



一部の生物( ゾウリムシ ) カバースリップとフラット スライドの間に形成されるよりも多くのスペースが必要です。ティッシュやスワブから綿を数本追加するか、壊れたカバースリップを少し追加すると、スペースが追加され、生物が「囲い込み」されます。

液体がスライドの端から蒸発すると、生きたサンプルが死ぬ可能性があります。蒸発を遅らせる 1 つの方法は、爪楊枝を使用して、カバースリップの端を薄い縁でコーティングすることです。 ワセリン サンプルの上にカバースリップを落とす前に。カバースリップを軽く押して気泡を取り除き、スライドを密閉します。

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ドライマウントスライド

科学者は、ドライ マウント スライドで使用するために標本を小片にカットします

ウラジミール・ブルガー/サイエンスフォトライブラリ/ゲッティイメージズ



ドライ マウント スライドは、スライド上に配置されたサンプル、またはカバーガラスで覆われたサンプルで構成できます。解剖スコープなどの低倍率顕微鏡の場合、オブジェクトの表面が検査されるため、オブジェクトのサイズは重要ではありません。複合顕微鏡の場合、サンプルは非常に薄く、できるだけ平らである必要があります。 1つを目指して 細胞 数セルの厚さ。サンプルの一部を削るには、ナイフまたはカミソリの刃を使用する必要がある場合があります。

  1. スライドを平らな面に置きます。
  2. ピンセットまたは鉗子を使用して、サンプルをスライドに配置します。
  3. サンプルの上にカバースリップを置きます。場合によっては、サンプルを顕微鏡のレンズにぶつけないように注意する限り、カバースリップなしでサンプルを表示しても問題ありません。サンプルが柔らかい場合は、「スカッシュ スライド」を作成できます。 やさしく カバースリップを押し下げます。

サンプルがスライドにとどまらない場合は、標本を追加する直前に透明なマニキュアでスライドをペイントすることで固定できます。これにより、スライドも半永久的になります。通常、スライドはすすいで再利用できますが、マニキュアを使用する場合は、再利用する前にスライドを除光液で洗浄する必要があります。



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血液塗抹スライドの作り方

血液学研究室で紫色のリーシュマン・ギムザ染色を施した血液塗抹標本のステンドグラススライド

アリンダム・ゴーシュ/ゲッティイメージズ



一部の液体は、ウェット マウント技術を使用して表示するには、色が濃すぎたり、濃すぎたりします。血液と精液は塗抹標本として準備されます。スライド全体にサンプルを均一に塗抹することで、個々の細胞を区別することができます。塗抹標本の作成は複雑ではありませんが、均一なレイヤーを作成するには練習が必要です。

  1. スライド上に液体サンプルの小滴を置きます。
  2. 2 番目のきれいなスライドを取ります。最初のスライドに対して斜めに持ちます。このスライドの端を使用して、ドロップに触れます。 毛細管現象 2 番目のスライドの平らな端が最初のスライドに接触する線に液体を描画します。 2 枚目のスライドを 1 枚目のスライドの表面に均等に描き、塗抹標本を作成します。圧力をかける必要はありません。
  3. この時点で、スライドを乾燥させて染色するか、塗抹標本の上にカバースリップを置きます。
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スライドを染色する方法

染色され、病理組織学用に設定されたスライドのスタック (H および E 染色)。

MaXPdia/ゲッティイメージズ



スライドを染色する方法はたくさんあります。ステインは、他の方法では見えない詳細を簡単に確認できるようにします。

単純な汚れにはヨウ素、 クリスタルバイオレット 、またはメチレンブルー。これらのソリューションは、ウェットマウントまたはドライマウントでコントラストを高めるために使用できます。これらの汚れのいずれかを使用するには:

  1. カバースリップを使用して、ウェット マウントまたはドライ マウントを準備します。
  2. カバースリップの端に汚れの小滴を追加します。
  3. カバースリップの反対側の端にティッシュまたはペーパー タオルの端を置きます。毛細管現象により、スライド全体に染料が引っ張られ、標本が染色されます。
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顕微鏡で調べる一般的なオブジェクト

ピンセットや顕微鏡スライドなど、科学者が毎日使用する顕微鏡および関連オブジェクト

キャロル・イェペス/ゲッティイメージズ

多くのありふれた食べ物や物は、スライドの魅力的な題材になります。ウェット マウント スライドは、食品に最適です。ドライ マウント スライドは、ドライ ケミカルに適しています。適切な科目の例は次のとおりです。

  • 食卓塩
  • エプソム塩
  • ミョウバン
  • 食器用洗剤粉末
  • 砂糖
  • パンや果物のカビ
  • 果物や野菜の薄切り
  • 人間またはペットの毛
  • 池の水
  • 庭の土(ウェットマウントとして)
  • ヨーグルト
  • ほこり